茜素紅染色

實(shí)驗(yàn)原理：

1.成骨誘導(dǎo)的過(guò)程是使鈣離子能夠以鈣鹽的方式沉淀下來(lái)，即“鈣結(jié)節(jié)"，鑒定鈣結(jié)節(jié)的染色方法常用茜素紅染色法。

2.茜素紅：茜素磺酸鈉，茜素s，茜素紅s，茜素胭脂紅，1，2-二羥基蔥醒-3-磺酸鈉，1，2-二羥基蔥醒-3-磺酸鈉鹽。橙黃色或黃棕色粉末。易溶于水，微溶于乙醇，不溶于苯。1%水溶液pH為2.15，其水溶液呈前黃褐色，加鹽酸后變?yōu)辄S色，加氫氧化鈉后則變成藍(lán)紫色。有刺激性。能與許多金屬離子生成有色化合物，能與錯(cuò)、釷、鋁、鈦及鈣發(fā)生顯色反應(yīng)。

3.染色原理：茜素紅與鈣發(fā)生顯色反應(yīng)，產(chǎn)生一種深紅色的帶色化合物，這樣成骨誘導(dǎo)的細(xì)胞外面沉積的鈣結(jié)節(jié)也就被染成了深紅色。

實(shí)驗(yàn)試劑及儀器：

1.試劑：PBS10醛緩沖液0.1%茜素紅-Tris-HCL染液蒸餾水

2.儀器：倒置顯微鏡

實(shí)驗(yàn)步驟：

1.棄培養(yǎng)液，PBS沖洗2次

2.10%甲醛緩沖液固定10min

3.蒸餾水沖洗3次

4.加入0.1%茜素紅-Tris-HCL染液（pH8.3），37℃下染色30min

5.蒸餾水沖洗

6.在倒置顯微鏡下觀察有無(wú)茜素紅染色陽(yáng)性細(xì)胞

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