抗酸染色

抗酸染色法acid－fast staining method 1882年由埃利希（F．Ehrlich），并經(jīng)F．齊爾（Ziehl）改進而創(chuàng)造出的細菌染色法。

其中代表性的為對結核菌的齊爾-尼爾森（Ziehl－Neelsen）染色法和齊爾-加貝特（Ziehl－Gabbet）染色法。用石炭酸復紅染色后，用鹽酸乙醇分色，再用美藍進行對比染色，即不再脫色而呈現(xiàn)石炭酸復紅的紅色。

抗酸染色的原理:

分枝桿菌的細胞壁內(nèi)含有大量的脂質(zhì)，包圍在肽聚糖的外面，所以分枝桿菌一般不易著色，要經(jīng)過加熱和延長染色時間來促使其著色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染料結合后，就很難被酸性脫色劑脫色，故名抗酸染色。齊-尼氏

抗酸染色法是在加熱條件下使分枝菌酸與石炭酸復紅牢固結合成復合物，用鹽酸酒精處理也不脫色。當再加堿性美蘭復染后，分枝桿菌仍然為紅色，而其他細菌及背景中的物質(zhì)為藍色。

抗酸染色一般步驟

1）初染

用玻片夾夾持涂片標本，滴加石炭酸復紅2-3滴，在火焰高處徐徐加熱，切勿沸騰，出現(xiàn)蒸汽即暫時離開，若染液蒸發(fā)減少，應再加染液，以免干涸，加熱3-5分鐘，待標本冷卻后用水沖洗。

2）脫色

3%鹽酸酒精脫色30秒~1分鐘；用水沖洗。

3）復染

用堿性美蘭溶液復染1分鐘，水洗，用吸水紙吸干后用油鏡觀察。

抗酸染色的染液配制

1、石炭酸復紅

堿性復紅酒精飽和溶液 10mL

5%石炭酸 90mL

2、3%鹽酸酒精

濃鹽酸 3mL

95%酒精 97mL

3、呂氏美蘭液

美蘭酒精飽和液 30mL

氫氧化鉀（1:10000） 100mL

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